1984年随父母从海南迁至深圳，1993年毕业于深圳大学计算机系。同年进入深圳润迅通讯发展有限公司开始寻呼系统的研究开发工作。1995年创建惠多网深圳站，名为ponysoft。

1998年，马化腾和同学张志东注册成立"深圳市腾讯计算机系统有限公司"，随后陈一丹、许晨晔、曾李青相继加入。

2017年8月7日，腾讯股价盘中再创历史新高价320.6港元，马化腾身家361亿美元成为中国首富。  2018年4月，获《时代周刊》2018年全球最具影响力人物荣誉。  2018年10月25日，福布斯发布了2018福布斯中国400富豪榜，马化腾凭借328亿美元的身家蝉联榜单第二名。2018年12月18日，党中央、国务院授予马化腾同志改革先锋称号，颁授改革先锋奖章   。2019年3月，马化腾以388亿美元财富排名2019年福布斯全球亿万富豪榜第20位。 2019年9月5日，突破奖基金会及其赞助人——马化腾等人共同宣布2020年突破奖及新视野奖的获得者。 2019福布斯中国慈善榜排名第4位。   2019年10月19日，入选2019福布斯年度商业人物之跨国经营商业领袖名单。 2019年11月7日，以2,545.50亿元财富值位列2019福布斯中国400富豪榜第2名。